5mC通过TET酶家族氧化生成5-羟甲基胞嘧啶(5hmC),进一步氧化产生5fC和5caC,参与DNA去甲基化过程。5hmC相对稳定,在肿瘤组织中含量较低,与肿瘤等疾病进展相关,具有作为生物标志物的潜力。中科普瑞提供基于糖基化保护+APOBEC脱氨酶法的5hmC检测服务,支持芯片与测序双平台,精准区分5mC与5hmC,为您的研究提供单碱基分辨率的羟甲基化图谱。
TET介导的5mC氧化产物,经5hmC→5fC→5caC途径参与主动去甲基化,调控基因表达。
5hmC含量虽远低于5mC,但相对稳定,在脑组织等组织中含量较高,具有独立表观调控功能。
肿瘤组织中5hmC水平显著降低,与肿瘤发生发展密切相关,在肿瘤早筛与诊断中具有重要价值。
通过β-GT糖基化转移酶保护5hmC,再经APOBEC3A脱氨酶选择性脱氨未修饰C和5mC,最终通过测序精准区分5mC与5hmC
β-葡萄糖基转移酶(β-GT)将葡萄糖基团特异性转移到5hmC的羟甲基上,形成糖基化的5gmC,从而保护5hmC不被后续脱氨酶作用。
APOBEC3A(A3A)脱氨酶能够高效脱去未修饰胞嘧啶(C)和5-甲基胞嘧啶(5mC)的氨基,使其变为尿嘧啶(U)和胸腺嘧啶类似物。糖基化保护的5gmC不被A3A识别。
经PCR扩增后,U对应位置变为T。测序中读为C的位点即为5hmC位点。结合总甲基化样本(如WGBS或芯片)的对比分析,可精准计算5mC和5hmC的各自水平。
单碱基分辨率、高特异性区分5mC/5hmC、无需重亚硫酸盐处理、DNA损伤小、兼容芯片与测序平台。
基于EPIC甲基化芯片平台的芯片法与基于高通量测序的测序法,两种技术路线各有优势,按需选择
基于EPIC 935K甲基化芯片平台,结合5hmC糖基化保护与APOBEC脱氨技术,一次性检测935,000个CpG位点的羟甲基化状态,适合大样本队列和EWAS研究。
基于DNA羟甲基化测序技术,分为全基因组5hmC测序和靶向捕获5hmC测序。全基因组模式可发现新型5hmC标记,靶向模式聚焦特定区域,深度更高,适合验证研究。
| 比较维度 | 芯片法(935K) | 全基因组测序法 | 靶向捕获测序法 |
|---|---|---|---|
| 覆盖范围 | 935,000 CpG位点 | 全基因组 | 目标区域(可定制) |
| 推荐数据量 | 标准芯片通量 | ~15G / 样本 | 目标区域80-100× |
| 分辨率 | 单碱基 | 单碱基 | 单碱基 |
| 适用场景 | 大样本队列、EWAS | 发现新标记、机制研究 | 验证研究、临床转化 |
| 样本量适配 | 大样本(几十~上千) | 中小样本(几~几十) | 中大样本(几十~几百) |
| 成本水平 | ★★★(性价比高) | ★(较高) | ★★(中等) |
糖基化保护 + 脱氨酶法双重保障,精准区分5mC与5hmC,特异性优于传统富集方法。
芯片 + 测序双平台,满足从大样本筛库到精细机制研究的不同通量需求。
精确定位每个5hmC位点,实现基因组水平的羟甲基化图谱绘制。
支持低输入样本,最低500ng基因组DNA即可完成检测,适合珍贵样本。
功能区域深度注释,CpG岛、启动子、增强子、基因体等多维注释与富集分析。
大量5hmC研究项目经验,覆盖肿瘤、神经、发育等多领域,助力高水平论文发表。
5mC/5hmC联合分析,动态修饰关联研究,揭示DNA甲基化调控的完整图景。
根据研究需求提供定制化生信分析方案,支持多组学联合分析与深入挖掘。
标准分析 + 高级分析,从质控到功能注释再到联合分析,全面解析羟甲基组学数据
支持多种样本类型,从基因组DNA到组织、细胞、血液、FFPE均有成熟方案
推荐≥1µg,最低≥500ng
推荐≥50mg
推荐≥1×10⁶个
推荐≥2mL
≥5张(10µm)
OD260/280 = 1.7~1.9
温馨提示: 样本采集与运输请遵循相应规范,如有特殊样本类型或保存条件疑问,欢迎咨询技术支持团队
从基础分析到深度联合分析,提供多档方案满足不同研究层次需求
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